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3M快速金黃色葡萄球菌數測試片操作以及判讀 |
一、測試金黃色葡萄球菌數 操作方法 | |
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二、測試金黃色葡萄球菌數 判讀方法 | |
快速金黃色葡萄球菌檢驗測試片(Petrifilm RSN)由兩部分組成,第一部分是金黃色葡萄球菌培養基片,次檢驗片含有修正Baird-Pdker 營養物幾一冷水可溶解的膠質,第二部分是熱安定核酸酶(TNase)反應片,包含有DNA,Toludine RSN-O(甲苯胺籃)及四唑指示劑(Terazolium),此一指示劑有助于菌落的計數及確定葡萄球菌熱安定核酸酶的存在.
熱安定核酸酶是一種金黃色葡萄球菌的酵素產物,在高溫下能維持穩定, 熱安定核酸酶的檢測象凝固酶反映一樣,是一種鑒定金黃色葡萄球菌的方法. 在Petrifilm RSN 檢測片上,熱安定核酸酶反應看起來像是粉紅色環帶包圍著的一個紅色、或籃子菌落. Petrifilm RSN 檢測片必須與Petrifilm熱安定核酸酶反應片一起使用,單獨使用將不會顯示菌落,因為具有輔助計數菌落的指示劑是在反應片上,而不是在Petrifilm RSN檢測片上。 |
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![]() 本圖片顯示一個典型的petrifilm RSA檢測片上的金黃色葡萄球菌的菌落,計算所有粉紅色環帶的菌落既是S.aureus,菌落可能是紅色或藍色. |
![]() 圖2顯示一個置人petrifilm 熱安定核酸酶反應片的petrifilm RSA 檢測片,在這檢測片上看不到菌落或熱安定核酸酶環帶. |
![]() 熱安定核酸酶反應的一種指示劑造成金黃色葡萄球菌呈紅色菌落,第二種指示劑使得熱安定核酸酶環帶顯示粉紅色. |
![]() 因為有些金黃色葡萄求菌只生產少量的熱安定核酸酶,所以無論大小計算所有的Tnase環帶菌落為金黃色葡萄球菌. Petrifilm RSA 檢測片上Tnase環帶的適當計數范圍大約是15-100個菌落.計數范圍高低端視 金黃色葡萄球菌生產Tnase環帶量的多寡及其他菌相生長狀況. |
![]() 有些金黃色葡萄球菌產生大量的熱安定核酸酶.這一類的金黃色葡萄球菌,于最后一階段培養時,只需30分鐘培養既可計算.因為已形成可目測的Tnase環帶. 注意:圖4與圖5有大約相同的菌落數.至于Tnase環帶大小的差異,可能來自菌株的不同或最后階段培養時間長短的差異. |
![]() Petrifilm 圖形的生長面積大約30平方公分.可以 估算方式,先數三個方格內粉紅色環帶的數量,在乘以10,即為所有在圖形培養范圍內的菌落數. |
![]() 當大量的金黃色葡萄球菌出現時,粉紅色Tnase 環帶可能重疊造成整個檢測片變成粉紅色. 圖7顯示一個檢測片中,因菌落過多無法計數(TNTC).建議進一步稀釋樣品來鑒定正確的菌落數. |
![]() 偶爾水化培養基的菌株會長在檢測片上.他們呈不規則形的紅色菌落,而且周圍無粉紅色Tnase環帶.亦不視為金黃色菌落但無粉紅色Tnase環帶,亦不視為金黃色葡萄球菌(如圓圈2). 若有大的食物顆粒存在,反應片不易與培養基均勻秘合,易造成圓形范圍邊緣產生氣泡(如圓圈3). |
![]() 食物顆粒是不規則形狀可能呈紅,藍或綠色(如圓圈4). 當二個金黃色葡萄球菌生長的相當靠近的時候,會導致其Tnase 環帶.計數時,請視為二個菌落(如圓圈5). |