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組織培養(yǎng) tissue culture

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-09-12
組織培養(yǎng) tissue culture 從多細(xì)胞生物的個體無菌地取出組織塊、細(xì)胞群,在適當(dāng)?shù)臈l件下使之繼續(xù)生活的技術(shù)。其中有將取出的組織移植培養(yǎng)在其他生物體的某一部位的體內(nèi)培養(yǎng)(culture in vivo)和培養(yǎng)在玻璃器內(nèi)的試管培養(yǎng)(culture in vitro)。前一種培養(yǎng),培養(yǎng)的組織塊盡量置于不受其生物體內(nèi)特異性影響的環(huán)境里,而一般所說的組織培養(yǎng)系多指后者。試管組織培養(yǎng)最初搞成功的,是哈利蓀(RGHarrison)氏(1907),將蛙的大塊神經(jīng)組織放在蛙的淋巴液培養(yǎng)基中進(jìn)行的。現(xiàn)在不僅廣泛用于細(xì)胞的繁殖、分化、癌的研究,而且還利用組織培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行藥物效果的研究,也不斷被利用于制造疫苗。另外,因為通過組織培養(yǎng)能獲得大量的單一的細(xì)胞群,所以用作生物化學(xué)的研究材料非常方便。因此,目前在整個生物科學(xué)領(lǐng)域,這種技術(shù)幾乎已成為不可缺少的了。組織培養(yǎng)有幾種方式。細(xì)胞培養(yǎng)是經(jīng)胰蛋白酶等處理使組織塊解離而獲得的細(xì)胞(細(xì)胞解離)。一般,細(xì)胞是在培養(yǎng)基上作為單層的薄片而擴(kuò)散(單層培養(yǎng))。最極端的方式是從單一細(xì)胞著手的純株培養(yǎng)。狹義的組織培養(yǎng)是使用小組織塊,懸滴培養(yǎng)是其中之一。器官培養(yǎng)是使用相當(dāng)大的組織、器官塊,并不使之單層擴(kuò)散,而是使之保持在三維結(jié)構(gòu)的狀態(tài)下進(jìn)行培養(yǎng);培養(yǎng)器一般為玻璃制或塑料制。培養(yǎng)可根據(jù)研究所需要的細(xì)胞數(shù),或為了便于光學(xué)觀察而選擇各種形狀、各種大小的材料。以前曾使用凝固血漿為培養(yǎng)基,但現(xiàn)在主要使用培養(yǎng)液。這種培養(yǎng)液除含有無機(jī)鹽外,還加入多種維生素類和氨基酸,制成各種合成培養(yǎng)基,根據(jù)研究的目的進(jìn)行選擇使用。但這只限于能在這種合成培養(yǎng)基上繁殖的細(xì)胞。通常動物細(xì)胞的培養(yǎng),要添加血清。植物細(xì)胞則添加椰子米乳液和酵母抽出液,或植物激素等以促其生長。培養(yǎng)用的材料應(yīng)保持最適溫度。對動物細(xì)胞,調(diào)節(jié)其氣體的環(huán)境也很重要,一般是將培養(yǎng)器保持在5CO295%空氣組成的氣態(tài)中。從包括人在內(nèi)的各種動物組織中,通過培養(yǎng)可得到一些半持久的、規(guī)則的繼續(xù)繁殖的細(xì)胞株。過去曾認(rèn)為,經(jīng)組織培養(yǎng)的細(xì)胞,除了器官培養(yǎng)外,比機(jī)體內(nèi)的組織細(xì)胞性質(zhì)變得更單純,而且不能維持分化特征,但現(xiàn)在認(rèn)為這并不是一般的規(guī)律。在植物細(xì)胞方面,由小塊組織中取到的一個細(xì)胞使之繁殖而成為一個完整的植物體已獲得成功。在動物方面,在試管內(nèi)進(jìn)行細(xì)胞雜交,通過培養(yǎng),而人工的得到具有新性質(zhì)的細(xì)胞的嘗試,正在獲得成功。
 
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