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流式細(xì)胞計(jì)的技術(shù)參數(shù)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2005-11-18
為了表征儀器性能,往往根據(jù)使用目的和要求而提出幾個(gè)技術(shù)參數(shù)或指標(biāo)來(lái)定量說(shuō)明。對(duì)于流式細(xì)胞計(jì)常用的技術(shù)指標(biāo)有熒光分辨率、熒光靈敏度、適用樣品濃度、分選純度、可分析測(cè)量參數(shù)等。

  (1)熒光分辨率:強(qiáng)度一定的熒光在測(cè)量時(shí)是在一定道址上的一個(gè)正態(tài)分布的峰,熒光分辨率是指兩相鄰的峰可分辨的最小間隔。通常用變異系數(shù)(C.V值)來(lái)表示。C.V的定義式為:

  C.V=σ/μ

  式中,σ為標(biāo)準(zhǔn)偏差,μ是平均值。

  在實(shí)際應(yīng)用中,我們使用挖關(guān)系式σ=0.423FWHM;其中FWHM為峰在峰高一半處的峰寬值。目前儀器的熒光分辨率均優(yōu)于2.0%。

  (2)熒光靈敏度:反映儀器所能探測(cè)的最小熒光光強(qiáng)的大小。一般用熒光微球上所標(biāo)可測(cè)出的FITC(fluorescein isothiocyanate 異硫氰基熒光素)的最少分子數(shù)來(lái)表示。目前儀器均可達(dá)到1000左右。

  (3)分析速度/分選速度:儀器每秒種可分析/分選的數(shù)目。一般分析速度為5000~10000;分選速度掌握在1000以下。

  (4)樣品濃度:主要給出儀器工作時(shí)樣品濃度的適用范圍。一般在105~107細(xì)胞/ml的數(shù)量級(jí)。

 
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