（一）材料與試劑配制

1．禽膽汁

2．飽和硫酸銨溶液

3．0.01Mol/L pH7.4PBS液

4．0.10Mol/L pH6.4PBS液（0.30Mol/L NaCl）

5． DEAE52-纖維素

（二）操作方法

1．取冷藏的膽汁3Ⅹml，緩慢滴加Ⅹml飽和硫酸銨液，邊加邊攪拌，使成25％飽和硫酸銨液。4℃放置30min。

1． 3 000r/min離心30min，去沉淀。

2． 取上清，加飽和硫酸銨液，使成35％的飽和度，4℃放置30min。

3． 3 000r/min離心30min，棄上清。

4． 取沉淀，加0.85％NaCl液溶解，加飽和硫酸銨溶液，重復(fù)步驟3和4三次。

5． 將沉淀用0.85％NaCl液溶解，裝入透析袋，以0.01Mol/L pH7.4PBS液透析。

6． 以0.01Mol/L pH7.4PBS液平衡，過(guò)DEAE52纖維柱（20×250mm）。

7． 取透析樣品4ml(﹥20mg/ml蛋白濃度)加入層析柱。以0.01Mol/L pH7.4PBS液洗脫。

8． 再用0.10Mol/L pH6.4PBS液（NaCl濃度為0.30Mol/L）洗脫，收集洗脫液。

10．濃縮洗脫蛋白液至20mg/ml，分裝，低溫冰箱保存。