资源新版在线天堂-桌下含校园污肉高h-坠落女教师-椎名由奈在线播放-六月色婷婷-六月丁香婷婷天天在线

VIP標識 上網做生意,首選VIP會員| 設為首頁| 加入桌面| | 手機版| RSS訂閱
食品伙伴網服務號
 
當前位置: 首頁 » 食品專題 » 生物實驗技術 » 細胞實驗技術 » 正文

細胞周期測定

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-07-08

一、原理
細胞周期指細胞一個世代所經歷的時間。從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。
單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法,但它不能代表細胞群體的周期,故現多采用其他方法測群體周期。
測定細胞周期的方法很多,有同位素標記法、細胞計數法等,這里介紹一種利用BrdU滲入測定細胞周期的方法。
BrdU(5-溴脫氧尿嘧啶核苷)加入培養基后,可做為細胞DNA復制的原料,經過兩個細胞周期后,細胞中兩條單鏈均含BrdU的DNA將占l/2,反映在染色體上應表現為一條單體淺染。如經歷了三個周期,則染色體中約一半為兩條單體均淺染,另一半為一深一淺。細胞如果僅??艘桓鮒芷冢?蛄教醯ヌ寰?釗盡<品至嚴嘀懈髕詒壤??涂傷慍魷赴?芷詰鬧怠?/SPAN>
二、儀器、用品與試劑
1、儀器、用品:同常規細胞培養
2、試劑:BrdU(1.0mg/ml),甲醇、冰醋酸,Giemsa染液,秋水仙素,2×SSC液
三、操作步驟
1、細胞生長至指數期時,向培養液中加入BrdU,使最終濃度為10μg/ml。
2、44小時加秋水仙素,使每ml中含0.1μg。
3、48小時后常規消化細胞至離心管中,注意培養上清的漂浮細胞也要收集到離心管中。
4、常規染色體制片(見第三部分:染色體技術)。
5、染色體玻片置56℃水浴鍋蓋上,鋪上2×SSC 液,距紫外燈管6cm處紫外照射30分鐘。
6、棄去2×SSC液,流水沖洗。
7、Giemsa液染色10分鐘,流水沖洗,晾干。
8、鏡檢100個分裂相,計第一、二、三、四細胞期分裂指數。
9、計算:

細胞周期(Tc)=48/{(M1 2M2 3M3 4M4)/100}(小時)

附:(1)BrdU配制: BrdU 10mg十雙蒸水10ml 4℃下避光保存。
(2)2×SSC配制: NaCl 1.75克,檸檬酸三鈉·2H2O 0.88克,加水至100ml,4℃保存。

 
[ 網刊訂閱 ]  [ 食品專題搜索 ]  [ ]  [ 告訴好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 關閉窗口 ] [ 返回頂部 ]

 

 
推薦圖文
推薦食品專題
點擊排行
 
 
Processed in 0.411 second(s), 819 queries, Memory 2.59 M
主站蜘蛛池模板: 97国产精品视频在线观看| 乌克兰xxxxx| 胸太大被男同桌吃好爽| 99热这里只有的精品| 精品淑女少妇AV久久免费| 亚洲AV蜜桃永久无码精品红樱桃| 俄罗斯aaaaa一级毛片| 欧美性暴力变态xxxx| 99久久夜色精品国产亚洲AV卜| 精品日韩视频| 亚洲视频区| 让男人玩尿道的女人| 1300部真实小Y女视频合集| 久久99精品AV99果冻| 亚洲熟妇AV乱码在线观看| 精品久久日日躁夜夜躁AV| 亚洲另类国产综合在线| 国产在线观看免费观看不卡| 亚洲大片免费看| 黄页网站免费视频大全9| 亚洲免费福利在线视频| 娇小老少配xxxxx| 亚洲综合香蕉在线视频| 久久久久久久久免费视频| 在线播放免费人成视频| 久久久久毛片免费观看| 2020久久精品永久免费| 女同给老师下媚药| 超碰99热在线精品视频| 十大禁止安装的黄台有风险| 国产精品久久久久久久久久免费 | 色噜噜2017最新综合| 国产成人免费片在线视频观看| 天美传媒在线观看免费完整版| 国产亚洲精品A久久777777 | 四虎永久在线精品国产免费| 国内精品乱码卡一卡2卡三卡| 伊人久久中文大香线蕉综合| 男女边吃奶边做边爱视频| PORN白嫩内射合集| 新香蕉少妇视频网站|