资源新版在线天堂-桌下含校园污肉高h-坠落女教师-椎名由奈在线播放-六月色婷婷-六月丁香婷婷天天在线

VIP標識 上網做生意,首選VIP會員| 設為首頁| 加入桌面| | 手機版| RSS訂閱
食品伙伴網服務號
 
當前位置: 首頁 » 食品專題 » 生物實驗技術 » 細胞實驗技術 » 正文

細胞凋亡晚期檢測

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-07-08

  細胞凋亡晚期中,核酸內切酶(某些Caspase的底物)在核小體之間剪切核DNA,產生大量長度在180-200 bp 的DNA片段。對于這一現象的檢測通常有以下幾種方法:

  1 TUNEL(Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end-labeling)

  通過DNA末端轉移酶將帶標記的 dNTP (多為dUTP)間接(通過地高辛)或直接接到DNA片段的3’-OH端,再通過酶聯顯色或熒光檢測定量分析結果。美國Intergen公司提供多種標記方法,直接熒光標記,地高辛介導熒光標記或過氧化物酶聯顯色,可做細胞懸液、福爾馬林固定或石蠟處理的組織、細胞培養物等多種樣本的檢測。其中,直接標記步驟少,操作簡便。而間接標記有信號放大的作用,檢測靈敏度高。

  2 LM-PCR Ladder (連接介導的PCR檢測)

  當凋亡細胞比例較小以及檢測樣品量很少(如活體組織切片)時,直接瓊脂糖電泳可能觀察不到核DNA的變化。CLONTECH公司的ApoAlert?LM-PCR Ladder Assay Kit通過LM-PCR(ligation-mediated PCR),連上特異性接頭,專一性地擴增核小體的梯度片段,從而靈敏地檢測凋亡時產生的核小體的梯度片段。此外,LM-PCR 檢測是半定量的,因此相同凋亡程度的不同樣品可進行比較。

  上述兩種方法都針對細胞凋亡晚期核DNA斷裂這一特征,但細胞受到其它損傷(如機械損傷,紫外線等)也會產生這一現象,因此它對細胞凋亡的檢測會受到其它原因的干擾。

   3 Telemerase Detection (端粒酶檢測)

  這是相對來說推出較早,用得較多的一種方法。端粒酶是由RNA和蛋白組成的核蛋白,它可以自身RNA為模板逆轉錄合成端粒區重復序列,使細胞獲得“永生化”。正常體細胞是沒有端粒酶活性的,每分裂一次,染色體的端粒會縮短,這可能作為有絲分裂的一種時鐘,表明細胞年齡、復制衰老或細胞凋亡的信號。研究發現,90%以上的癌細胞或凋亡細胞都具有端粒酶的活性。Intergen公司的TRAP-eze Telemerase Detection Kit在1996年率先推出。它提供特定的寡核苷酸底物,分別與底物及端粒重復序列配對的引物。如果待測樣本中含有端粒酶活性,就能在底物上接上不同個數的6堿基(GGTTAG)端粒重復序列,通過PCR反應,產物電泳檢測就可觀察到相差六個堿基的DNA Ladder現象(參見圖4)。此外,Intergen公司還提供用酶聯免疫法(ELISA)檢測的試劑盒.

   同樣,這種檢測方法也不專對細胞凋亡,檢測結果也不純反應細胞凋亡的發生。

 
[ 網刊訂閱 ]  [ 食品專題搜索 ]  [ ]  [ 告訴好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 關閉窗口 ] [ 返回頂部 ]

 

 
推薦圖文
推薦食品專題
點擊排行
 
 
Processed in 0.147 second(s), 19 queries, Memory 0.88 M
主站蜘蛛池模板: 妞干网手机免费视频| 国产在线一区二区AV视频| 猫咪www958ii| 夜夜躁日日躁狠狠| 国内自拍 在线 亚洲 欧美| 午夜精品国产自在现线拍| 国产精品无码人妻在线| 小sao货ji巴cao死你视频| 国产互换后人妻的疯狂VIDEO| 色列少女漫画| 国产h视频在线观看网站免费| 秋霞电影午夜伦午夜| bbbbbxxxxx肥胖| 全黄h全肉细节文在线观看| RUNAWAY韩国动漫免费网| 品色堂主页| yellow免费观看完整版直播| 人妻超级精品碰碰在线97视频 | 欧美高清 videos sexo| 把腿张开再深点好爽宝贝| 无码专区无码专区视频网网址| 国产自拍视频在线一区| 在线天天看片免费视频观看| 男女牲交全过程免费播放| xfplay 无码专区 亚洲| 日本无码欧美激情在线视频| 国产精品一国产精品免费| 亚洲影院在线播放| 欧美最新色p图| 国产精品悠悠久久人妻精品| 伊人大香线蕉影院在线播放| 欧美日韩国产高清综合二区 | 中文字幕人妻无码系列第三区| 亲女乱h文小兰第一次| 国产在线观看成人免费视频| 伊人久久免费| 欧美影院在线观看完整版 mp4 | 国产免费看片| 99 久久99久久精品免观看| 爽娇妻快高h| 久久久擼擼擼麻豆|