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應用發(fā)光細菌檢測水質毒性與環(huán)境毒性

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2013-07-26
核心提示:簡介: 發(fā)光細菌是一類在正常的生理條件下能夠發(fā)射可見光的細菌。發(fā)光細菌在正常的生理條件下能發(fā)出波長在450~490nm 的藍綠色可
 

簡介:

        發(fā)光細菌是一類在正常的生理條件下能夠發(fā)射可見光的細菌。發(fā)光細菌在正常的生理條件下能發(fā)出波長在450~490nm 的藍綠色可見光,在一定的試驗條件下發(fā)光強度是恒定的。與外來受試物接觸后,由于毒物具有抑制發(fā)光的作用,發(fā)光細菌的發(fā)光強度即有所改變,變化的程度與受試物的濃度在一定范圍內呈相關關系,同時與該物質的毒性大小有關。
        利用發(fā)光細菌來檢測有毒物質,由于有毒物質僅干擾發(fā)光細菌的發(fā)光系統(tǒng),發(fā)光強度的變化可以用發(fā)光光度計測出,費時較少且靈敏度高,操作簡便,結果準確,所以利用發(fā)光細菌的發(fā)光強度作為指標來監(jiān)測有毒物質,在國內外越來越受到重視,在環(huán)境監(jiān)測中的應用也越來越廣泛。我國于1995年將這一方法列為環(huán)境毒性檢測的標準方法(GB/T15441—1995)。
        目前國內常用的3種發(fā)光細菌為:明亮發(fā)光桿菌、費氏弧菌、青海弧菌。其中明亮發(fā)光桿菌在“GB/T15441-1995 水質 急性毒性的測定 發(fā)光細菌法”中所使用;費氏弧菌在歐盟的標準中所使用;青海弧菌是在青海湖的魚體內提取的菌種,屬淡水菌,在測試飲用水時有較大優(yōu)勢。
 

原理:

 

檢測方法:

以明亮發(fā)光桿菌T3小變種檢測為例:

1. 試劑與材料準備
發(fā)光細菌凍干粉復蘇:使用3%的氯化鈉復蘇發(fā)光細菌凍干粉,然后稀釋到1萬細胞/ml,形成工作液
參比毒物氯化汞:制作不同濃度的氯化汞作為參比毒物0.02 - 0.24mg/L
樣品:采集或準備相應的待測樣品,使用蒸餾水稀釋,然后加入氯化鈉(終濃度3%)

2. 儀器
單管或微孔板發(fā)光檢測儀

3. 樣品檢測
取一定量的發(fā)光細菌工作液,放入發(fā)光檢測儀中檢測發(fā)光值;加入待測樣品,混勻,孵育15分鐘;孵育完成后,檢測殘留發(fā)光值。

 

參考文獻:

  1. China SEPA. 1995. GB/T15441—1995. Technology Supervision Bureau,The People’s Republic of China national standards, Water qu ality-Determination of the acute toxicity —Luminescent bacteria test[S].China SEPA (in Chinese)
編輯:songjiajie2010

 
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